1. 產品分類
      您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 超濾離心管的使用注意事項
      超濾離心管的使用注意事項
    2. 發布日期:2023-01-10      瀏覽次數:1131
      • 超濾離心管,備有四種材質的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用

        使用注意事項:
        (1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。

        (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。

        (3)平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。不同離心機的轉速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調至檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理。膜與轉軸的方向根據說明書調整(
        角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。

        (4)當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀,導致堵管。若發生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發生沉淀為止。

        (5)前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續三次,最后一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。

      主站蜘蛛池模板: 色窝窝免费一区二区三区 | 免费毛片在线视频| 免费一级毛片在线播放视频免费观看永久 | 国产精品综合专区中文字幕免费播放 | 亚洲无码视频在线| 2020天堂在线亚洲精品专区| 四虎在线最新永久免费| 亚洲精品国产肉丝袜久久| 亚洲AV无码一区二区一二区| **aaaaa毛片免费同男同女| 亚洲国产日韩一区高清在线| 特级无码毛片免费视频尤物| 婷婷亚洲久悠悠色悠在线播放| 最近免费mv在线观看动漫| 永久黄网站色视频免费直播| 亚洲爆乳成av人在线视菜奈实| 午夜视频免费观看| 麻豆亚洲av熟女国产一区二| 爱爱帝国亚洲一区二区三区| 亚洲国产人成精品| 亚洲人成综合网站7777香蕉| 永久免费看bbb| 国产精品1024在线永久免费| 久久亚洲AV无码精品色午夜麻| 88xx成人永久免费观看| 欧洲 亚洲 国产图片综合| 四虎影院永久免费观看| 国产成人无码免费看片软件| 亚洲欧洲国产精品你懂的| 青青青国产在线观看免费网站 | 成人免费看吃奶视频网站| 精品成人一区二区三区免费视频| 久久精品国产亚洲7777| 亚欧免费一级毛片| 亚洲精品久久久久无码AV片软件| www.亚洲色图| 色九月亚洲综合网| 国产亚洲精久久久久久无码77777| 99久久久国产精品免费牛牛| 国产亚洲综合久久| 日产亚洲一区二区三区|