1. 產品分類
      您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 多克隆抗體的免疫電泳技術
      多克隆抗體的免疫電泳技術
    2. 發布日期:2011-12-23      瀏覽次數:1660
      •                                                             多克隆抗體的免疫電泳技術

        實驗原理】

        免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術,這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中,首先利用蛋白質的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質進行分離,然后將特異性的抗體引入到與電泳方向平行的凹槽中,在抗原和抗體的擴散過程中,抗原和抗體適當比例的結合會導致沉淀的產生。0.85%鹽不僅可以終止擴散過程也可用于洗去未結合的蛋白,抗原和抗體結合所形成的沉淀線即可以肉眼觀察也可利用染色方法觀察。
        免疫電泳技術不僅可用于血清或尿樣中單克隆抗體的鑒定,也可用于其它方面,比如免疫復合物的篩選、各種異常丙種球蛋白血癥的識別和鑒定等。免疫電泳技術也是進行蛋白質常規評價的一種可靠,的實驗方法,可觀察蛋白質結構的變化和濃度的改變。
        【實驗材料】
        實驗器材
        水平電泳儀;打孔器;滴管;刀片;電源;水浴(55℃);蒸餾水;燒杯(400-600ml);加樣槍(5-100μl)。
        實驗試劑
        ⑴ 純化的抗體;蛋白質混合物;1%瓊脂。
        ⑵ Tris-巴比妥緩沖溶液:2.24g 巴比妥酸,4.43g Tris,0.053g 乳酸鈣及0.065g *溶于100ml 蒸餾水中。
        ⑶ 電泳緩沖溶液:將Tris-巴比妥緩沖溶液與蒸餾水按1:4的比例混合。
        【實驗方法】
        準備瓊脂糖凝膠
        將瓊脂和電泳緩沖溶液混合放入90℃水浴加熱至溶化,制成1%瓊脂,將瓊脂在冷卻前鋪在水平玻璃板上,待冷卻至室溫后,按圖用內徑4毫米的打孔器打孔及制作凹槽。

         
        電泳
        將用電泳緩沖溶液稀釋的4%-5%的抗原用滴管小心放入小孔中,將膠板放入電泳槽中并用潤濕的濾紙將膠板和電泳槽中的緩沖溶液相連。蓋上電泳槽蓋,接通電源,6V/cm通電至前沿移動約35mm,時間約為1小時,利用示蹤染料判斷移動距離。
        擴散
        將膠板移出電泳槽并放在水平位置上,用濾紙潤干膠板凹槽中的緩沖溶液,在凹槽中加入適量的抗體(0.2ml~0.25ml),注意抗體不能溢出凹槽以避免污染.將膠板移至含有*且有一定濕度的盒內,加蓋密封后在30℃水浴擴散至少10小時后,移至0.85%鹽水中以終止擴散并洗去未結合的蛋白。
        【實驗結果】
        觀察抗原和抗體之間所形成的沉淀線,并進行記錄。
         
      主站蜘蛛池模板: 亚洲精品自在在线观看| 亚洲免费视频播放| 国内大片在线免费看| 无码乱人伦一区二区亚洲| aaa毛片免费观看| 日韩免费高清视频网站| 91亚洲自偷在线观看国产馆| 久久国产免费观看精品| 亚洲无码视频在线| 337p日本欧洲亚洲大胆人人| 青青青国产在线观看免费| 国产精品免费精品自在线观看| 91人成网站色www免费下载| 亚洲成AV人片在线观看| 香港a毛片免费观看| 91亚洲国产成人精品下载| 99久9在线|免费| 亚洲欧洲日产国码在线观看| 97热久久免费频精品99| 在线综合亚洲欧洲综合网站| 日本一道高清不卡免费| 午夜亚洲乱码伦小说区69堂| 国产成人毛片亚洲精品| 无码AV片在线观看免费| 亚洲av永久无码精品天堂久久| 最近免费中文字幕视频高清在线看| 亚洲精品国产综合久久久久紧| 免费人成在线观看网站视频| 久久国产乱子精品免费女| 国产精品亚洲片在线va| 免费人成激情视频| 大地资源在线资源免费观看| 亚洲国产日韩在线人成下载 | 亚洲自偷自拍另类图片二区| 91嫩草国产在线观看免费| 国产AV无码专区亚洲AV麻豆丫| 亚洲人成图片小说网站| 亚洲人成网站免费播放| 一级毛片免费不卡| 亚洲三级在线免费观看| 中文字幕亚洲图片|