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      抗體稀釋液和ELISA相關溶液的配制
    2. 發布日期:2010-02-21      瀏覽次數:4461
      • 上海聯碩生物科技有限公司

        抗體稀釋液和ELISA相關溶液的配制

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        1、抗體或免疫球蛋白稀釋液0.01mol/L pH7.2PBS
          

         NaH2PO4·2H2O

        0.39

        Na2HPO4

        1.27

        NaCl

        0.85

        NaN3

        200mg

        H2O(蒸餾水)

        至    1000ml

        2ELISA洗液及HRP標記抗體稀釋液PH7.4PBST 

        NaCl

        2.0

        KH2PO4

        0.2

        Na2HPO4·12H2O

        2.9

        KCl

        0.2

        NaN3

        0.2

        H2O

        至    1000ml

        吐溫(Tween20

        0.5ml

          4°C保存備用

        3、包被液(簡稱CBpH9.6  

        Na2CO3

        1.59

        NaHCO3

        2.93

        NaN3

        0.2

        H2O

        至    1000ml

          密封蓋好,4°C存放備用

        4ELISA底物液(可溶性底物)
          

        磷酸-檸檬酸緩沖液pH5.0

         

        0.1mol/L檸檬酸(21.014/100ml)

        24.3ml

        0.2mol/L Na2 HPO428.4/1000ml)

        25.7ml

        H2O

        50ml

          4°C存放備用

        5DAB底物液(不溶性底物,組化病理等)
          

        0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL

         

        Tris

        6.05

        HCL(36%)

        3.15克(約2.7mlHCL

        H2O

        至                            1000ml

        DAB3´3´二氧基聯苯胺,不溶性底物,呈棕紅色

        6DAB溶液配制:(組化及Western blot 顯色)
         DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL緩沖液100ml溶解,如有沉淀,過濾后使用,一般新鮮配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2濃度為0.01%,混均后使用。 73´3´5´5´-四甲基聯苯胺(TMB)溶液配制:
         用二甲基甲酰胺(dimethylformamideDMF)或無水乙醇,將TMB配成1%濃度,4°C保存半年以內使用。使用前,用pH5.0磷酸-檸檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul,混勻后立即使用。2N H2SO4終止后,450nm測定OD值。 

        81%離子瓊脂膠配制液
            作免疫雙相擴散,單相擴散及免疫電泳中使用。
           0.05UpH8.6巴比妥鈉-HCL緩沖液  

        巴比妥鈉

        23.8

        1mol/L HCL

        34.5ml

        H2O

        2150ml


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